Masa Terbitkan: 2022-05-25 Asal: Tapak
Penyediaan larutan emas koloid untuk Ujian antigen mengamalkan kaedah pengurangan trisodium sitrat untuk menyediakan larutan emas koloid. Ambil 1000 mL air ultratulen dan panaskannya hingga mendidih pada pengacau magnet, tambah 40 mL larutan asid kloroaurik 1%, apabila larutan mendidih semula, masukkan dengan cepat 36 mL larutan trisodium sitrat 1%, teruskan mendidih apabila warna larutan bertukar menjadi ungu 5min, matikan pemanas air, dan simpan semula. Purata diameter dan potensi Zeta bagi zarah emas koloid diukur dengan penganalisis saiz nanopartikel dan disimpan pada suhu bilik dalam gelap. Jadi apakah maklumat tentang penyediaan larutan emas koloid untuk ujian Antigen? Mari kita lihat.
Berikut ialah senarai kandungan:
l Penyediaan Konjugasi Berlabel Emas Koloid
l Penyediaan jalur ujian Antigen pantas
l Had pengesanan minimum
l Ujian kestabilan
Ambil 100 mL emas koloid ujian Antigen ke dalam dua bikar bersih, masing-masing, mengikut keadaan pH yang ditandakan yang dioptimumkan, tambah 3.3 mL dan 2.1 mL 0.1 mol/L kalium karbonat untuk melaraskan pH, kacau dengan pengacau magnet pada 300 r/min selama 10 minit, dan tambahkan setiap protein antibody DNP-N monoklonal dan protein DNP-BSN setiap satu. kacau selama 15 minit; 2 mL larutan BSA 10% telah ditambah, dan 2 mL larutan BSA 10% telah ditambah, dan pengadukan diteruskan selama 20 minit; selepas kacau, larutan emas koloid ujian Antigen dipindahkan ke dua tiub emparan 50 mL, tetapkan parameter emparan ialah 9000 r/min, 20 min, dan 4 °C, dan sentrifugasi dilakukan. Selepas sentrifugasi, keluarkan tiub centrifuge dengan berhati-hati, jangan goncang, keluarkan supernatan dengan pipet, kumpulkan mendakan, masukkan semula dengan pencair konjugat hingga 10 mL, dan simpan pada suhu 4°C dalam gelap. Purata diameter dan potensi Zeta bagi zarah konjugat emas koloid ujian Antigen diukur dengan penganalisis saiz nanopartikel.
Pad sampel disalut secara seragam dengan larutan rawatan pad sampel, dan jumlah salutan setiap gentian kaca ialah 30 mL dan dikeringkan pada suhu 50°C selama 24 jam. cairkan ujian Antigen pantas antibodi monoklonal anti-N protein berlabel emas koloid dan konjugat protein DNP-BSA berlabel emas koloid dengan pelarut konjugat, nisbah isipadu ialah 18% dan 20%, masing-masing, dan merawat dengan konjugat emas koloid yang dicairkan pad pengganding disalut secara seragam dengan cecair, jumlah salutan setiap gentian kaca drimL ialah 45°. 24j. Antibodi monoklonal protein anti-N tikus dan antibodi poliklonal anti-DNP arnab telah dicairkan dengan PBS yang mengandungi 0.01mol/L pH7.4 dan 5% trehalosa kepada kepekatan 2.0mg/mL dan 1.0mg/mL, masing-masing. Sebagai garis pengesanan (garisan T) dan garis kawalan kualiti (Cline), antibodi penangkapan disalut pada membran nitroselulosa (membran NC) dan dikeringkan pada suhu 45°C selama 48 jam. Filem NC yang telah disediakan, pad konjugat, pad sampel, dan pad penyerap air ditampal pada plat bawah PVC secara bergilir-gilir, dipotong menjadi 3mm/jalur dengan slitter, dimasukkan ke dalam bekas kad, dan dibungkus dalam beg aluminium foil. Semasa ujian, masukkan swab nasofaring ke dalam tiub pengangkat yang telah diisi terlebih dahulu dengan larutan pengekstrakan (10mmol/LPBS, pH7.4, 1%NP-40), dan tambahkan 3 titis (100μL) secara titisan ke lubang sampel kad ujian selepas pengekstrakan selama 15s. Masa tindak balas 15 minit untuk tafsiran visual. Garis T ujian antigen dan Cline kedua-duanya positif, garis T tidak berwarna, Cline negatif, Cline tidak berwarna, menunjukkan bahawa jalur ujian berkesan, dan ia perlu diuji semula.
Kajian had pengesanan minimum dilakukan dengan kultur virus yang dibunuh oleh haba. eluat daripada swab nasofaring daripada orang yang sihat digunakan sebagai matriks negatif untuk ujian Antigen. Pertama, pencairan kecerunan 10 kali ganda dilakukan. Selepas keputusan negatif ujian Antigen pantas, kepekatan sebelumnya ialah pencairan kecerunan 2 kali ganda, dan tidak kurang daripada 19 kali daripada 20 ujian adalah positif. Tahap kepekatan (≥95%) digunakan sebagai had pengesanan minimum reagen.
Letakkan kad reagen siap ujian Antigen yang disediakan dalam ketuhar 50°C, dan uji dengan bahan kawalan kualiti kepekatan tinggi dan rendah setiap dua minggu. Ulangi ujian 3 kali untuk setiap sampel. Perbezaan dalam kedalaman jalur antara reagen pemusnah dipercepat suhu tinggi dan reagen kawalan selama 1 minggu dan 8 minggu.
Di atas adalah maklumat yang berkaitan tentang penyediaan larutan emas koloid untuk ujian Antigen. Jika anda berminat dengan Ujian Antigen pantas COVID-19, Ujian Antigen Pantas SARS-CoV-2, anda boleh menghubungi kami. Laman web kami ialah www.bioteke.cn.
hak ciptaBiotee Corporation (Wuxi) Co., Ltd