Kandungan Teknologi dalam Tiub Persampelan Virus

Pandemik COVID-19 terus muncul semula di China dan menjadikan situasi pencegahan kritikal. Kualiti ujian asid nukleik untuk COVID-19 memainkan peranan penting dalam situasi pencegahan. Pada masa ini, tiub pensampelan virus hanya diperlukan untuk rekod perubatan Kelas I, tetapi produk dalam pasaran berbeza dalam kualiti yang berbeza. Tumpuan parameter pembidaan adalah cetek, selalunya menumpukan pada bahan, spesifikasi dan saiz tiub pensampelan, untuk tiub pensampelan yang dinyahaktifkan atau tidak, dsb., mengabaikan petunjuk prestasi pemeliharaan yang lebih kritikal, yang meningkatkan kesukaran melaksanakan dasar sifar Covid yang dinamik dan menangani kesan COVID-19 melalui cara yang disasarkan.

I. Apakah tiub pensampelan virus dan apakah fungsinya?

Tiub pensampelan virus ialah sejenis bahan habis guna ujian pakai buang yang digunakan untuk mengekalkan aktiviti sampel virus atau untuk mengekalkan kestabilan asid nukleik dalam sampel.

Tiub pensampelan virus biasanya terdiri daripada tiga bahagian: swab pensampelan pakai buang, tiub pensampelan virus pakai buang dan beg keselamatan biologi.

Cecair merah dalam tiub pensampelan virus adalah penyelesaian pemeliharaan virus, yang boleh dibahagikan kepada jenis tidak aktif dan tidak aktif. Menurut Garis Panduan Pelaksanaan untuk Organisasi Ujian Asid Nukleik COVID-19 Serantau (Edisi Ketiga), adalah dicadangkan bahawa tiub pensampelan yang mengandungi garam guanidinium (guanidinium isothiocyanate atau guanidinium hydrochloride, dsb.) atau surfaktan hendaklah dipilih untuk pemeriksaan populasi. Ia mempunyai kelebihan dengan cepat menyahaktifkan COVID-19 dalam swab, mencegah jangkitan silang dalam pengesanan, menghalang aktiviti nuklease, dan mengekalkan kestabilan asid nukleik virus.

II. Kandungan teknologi dan indeks prestasi swab

Swab pensampelan pakai buang dibuat dengan teknik berbondong-bondong dengan bulu nilon yang disembur secara menegak pada batang ABS yang terpaku. Dengan itu, sel terkelupas epitelium daripada lesi pesakit yang terkumpul boleh ditanggalkan dan dilepaskan ke dalam larutan pemeliharaan untuk pengesanan virus dengan cara yang lengkap dan pantas.

(1) Kelebihan swab berkelompok nilon

Penjerapan tinggi: The penjerapan kecekapan swab berkelompok nilon adalah 20%-60% lebih tinggi daripada swab lain.

Pengumpulan pantas: Sapuan nilon berbondong-bondong mengambil masa hanya 3 saat hingga 11 saat untuk menyerap dan mengumpul sampel; manakala swab kapas mengambil masa sehingga 15 saat hingga 120 saat untuk mengumpul sampel.

Pelepasan tinggi: Eksperimen pengumpulan patogen domestik mendapati bahawa kecekapan pelepasan swab nilon berkelompok selepas pengumpulan patogen adalah hampir serupa dengan kumpulan kawalan positif bebas swab pada kepekatan pencairan yang berbeza; manakala kecekapan pelepasan patogen yang dikumpul daripada swab kapas adalah jauh lebih rendah, dan hasilnya lebih dipengaruhi oleh kepekatan pencairan.

(2) Keselamatan swab kepada tubuh manusia

Pemantauan berterusan wabak itu telah menjadikan saringan asid nukleik sebagai sebahagian daripada kehidupan harian, dengan tiga atau empat ujian seminggu, malah sesetengah kakitangan industri perkhidmatan perlu menjalankan ujian asid nukleik setiap hari, di mana swab perlu bersentuhan langsung dengan mukosa mulut dan hidung, jadi keselamatan swab tidak boleh diabaikan.

ISO 10993-10: 2010 Penilaian Biologi Peranti Perubatan - Bahagian 10: Ujian untuk Kerengsaan dan Kepekaan Kulit menilai biokeselamatan swab pensampelan daripada tiga dimensi berasingan, iaitu sitotoksisiti, kerengsaan kulit dan pemekaan kulit, untuk membantu kami memilih swab pensampelan yang selamat untuk tubuh manusia.

III. Spesifikasi teknikal tiub pensampelan virus

Sampel swab yang disimpan dalam tiub pensampelan virus perlu dihantar ke makmal molekul untuk pengesanan asid nukleik. Memandangkan bahan genetik COVID-19 ialah RNA, yang sangat tidak stabil dan mudah terdegradasi pada suhu yang terlalu tinggi, dan enzim nuklease yang terdapat di mana-mana juga boleh menyebabkan degradasinya. Oleh itu, keupayaan tiub pensampelan untuk mengekalkan RNA virus secara stabil menjadi kunci kepada ketepatan ujian asid nukleik.

Kualiti tiub pensampelan bukan sahaja soal nampak penunjuk, tetapi yang lebih penting, adalah tidak kelihatan penunjuk. The nampak penunjuk termasuk penunjuk kualiti yang boleh diperhatikan secara langsung, seperti bahan tiub pensampelan, tahap proses, pengedap dan ketepatan pengisian. The tidak kelihatan penunjuk termasuk kesan pemeliharaan asid nukleik virus, kesan had pengesanan minimum, penunjuk mikrob, kecekapan penyahaktifan virus, dll. Penunjuk ini adalah kunci untuk menentukan pengesanan asid nukleik virus.

Penunjuk utama 1: Kesan pemeliharaan asid nukleik virus

Virus ini tidak aktif dalam tiub pemeliharaan, melepaskan RNA bahan genetik. RNA untai tunggal sangat tidak stabil secara in vitro, yang sangat terdedah kepada degradasi dan hidrolisis. Peranan penyelesaian pemeliharaan virus adalah untuk mengekalkan integriti RNA virus dan menghalang degradasi dan hidrolisis. Suhu, keadaan pengangkutan dan hari penyimpanan semuanya akan menjejaskan integriti RNA. Lebih baik perlindungan RNA, lebih tepat pengesanan asid nukleik virus.

Prestasi pemeliharaan tiub pensampelan virus berbeza sangat berbeza. Dua jenama tiub pensampelan di atas, A dan D, telah menguji hasil pengesanan asid nukleik virus yang disimpan pada suhu 4 °C, 25 °C dan 37 °C selama 24 jam masing-masing. Nilai Ct tiub pengawetan A hampir tidak berubah daripada yang baru diambil sampel, menunjukkan bahawa kesan pengawetan adalah baik, manakala asid nukleik virus tidak dapat dikesan dalam tiub pengawetan D daripada 4^ke jam.

Penunjuk utama 2: Kesan pemeliharaan pada had pengesanan minimum

Tujuan penunjuk ini adalah untuk memastikan sampel dengan viral load yang rendah dapat dikesan tanpa salah penilaian negatif palsu.

Keperluan negara ialah sensitiviti pengesanan COVID-19 tidak boleh lebih tinggi daripada 500 salinan/ml. Dalam erti kata lain, selagi kepekatan sampel tidak lebih rendah daripada 500 salinan/ml, ia harus dikesan. Bagaimanapun, realitinya ialah selepas saringan populasi berskala besar atau pensampelan asid nukleik di kawasan terpencil, sampel tidak boleh dihantar segera ke makmal untuk ujian. Sampel dengan viral load yang rendah mungkin terdegradasi secara serius kepada kepekatan di bawah 500 salinan/ml, mengakibatkan ujian terlepas, iaitu, keputusan ujian negatif palsu.

Penunjuk utama 3: Penunjuk mikrob

Tiub pensampelan virus hendaklah dihasilkan melalui pembungkusan bukan toksik pakai buang dan proses penyahaktifan sinaran. Jumlah bakteria aerobik (CFU/mL) ≤ 200; dan jumlah acuan dan yis (CFU/mL) ≤ 100 diperlukan.

Cecair dalam tiub pensampelan virus adalah penyelesaian pemeliharaan virus, di mana penunjuk warna fenol merah ditambah. Dalam keadaan biasa, cecair mestilah beralkali dan berwarna merah ungu. Apabila mikroorganisma dalam tiub pensampelan gagal memenuhi keperluan, pembiakannya akan menyebabkan penurunan nilai pH cecair, dan larutan pengawetan akan bertukar dari merah kepada kuning. Ia boleh menilai secara visual sama ada mikroorganisma mencapai keperluan melalui warna cecair tiub. Kehadiran mikroorganisma akan mempercepatkan degradasi RNA virus dan menjejaskan sensitiviti pengesanan asid nukleik.

Penunjuk utama 4: Kecekapan penyahaktifan virus

Mengikut notis dalam Buku kerja untuk Ujian Asid Nukleik SARS-CoV-2 di Institusi Perubatan (Edisi Percubaan 2), saringan populasi harus memilih tiub pensampelan dengan fungsi penyahaktifan virus, seperti garam guanidine (guanidine isothiocyanate atau guanidine hydrochloride, dll.) atau surfaktan. Penyelesaian pemeliharaan sampel yang secara langsung menyahaktifkan virus adalah sangat diingini untuk barisan hadapan wabak, yang boleh meningkatkan keselamatan proses pengumpulan dan pengangkutan sampel. Ia hendaklah mempunyai kecekapan penyahaktifan virus yang tinggi. Seperti yang ditunjukkan dalam jadual berikut, tiub pemeliharaan virus boleh mencapai 99.99% kecekapan penyahaktifan virus dalam 1 minit.

Kesimpulan

Dengan permintaan yang begitu besar untuk ujian dan pasaran, sudah pasti akan ada produk baik dan buruk di pasaran. Tetapi dalam bidang saringan asid nukleik COVID-19, yang berkaitan dengan ekonomi negara dan mata pencarian rakyat, kualiti produk lebih penting daripada harga. Kita harus mematuhi prinsip kualiti terlebih dahulu, memastikan ketepatan ujian asid nukleik, dan jangan menjadi bijak dan bodoh.