Pengenalan kepada mesin PCR

mesin PCR, juga dikenali sebagai instrumen amplifikasi gen PCR, instrumen amplifikasi PCR, instrumen amplifikasi asid nukleik tindak balas rantai polimerase, ialah instrumen yang menguatkan DNA tertentu menggunakan teknologi PCR (Polymerase chain reaction). Mesin PCR digunakan secara meluas dalam makmal perubatan dan biologi, seperti untuk menentukan sama ada badan ujian akan mempamerkan mesin PCR digunakan secara meluas dalam makmal perubatan dan biologi, contohnya, untuk menentukan sama ada organisma ujian mempamerkan profil penyakit genetik, untuk mendiagnosis penyakit berjangkit, untuk mereplikasi gen, dan untuk mengenal pasti keturunan. Apakah mesin PCR?

Berikut ialah senarai kandungan:

l Struktur asas mesin PCR

l Prinsip kerja mesin PCR

l Kinetik tindak balas mesin PCR

Struktur asas mesin PCR

Mesin PCR biasanya terdiri daripada bahagian penutup panas, bahagian kitaran haba, bahagian penghantaran, bahagian kawalan, dan bahagian bekalan kuasa, dsb.

Prinsip kerja mesin PCR

Prinsip kerja bagi mesin PCR adalah serupa dengan proses replikasi semula jadi DNA, yang kekhususannya bergantung pada primer oligonukleotida yang melengkapi kedua-dua hujung jujukan sasaran, dan terdiri daripada tiga langkah tindak balas asas: denaturation-annealing-extension.

1. Denaturasi DNA templat

DNA templat dipanaskan kepada kira-kira 93°C untuk masa tertentu untuk mengasingkan DNA templat dua untai atau DNA untai dua yang dibentuk oleh mesin PCR untuk menjadikannya untai tunggal supaya ia boleh mengikat primer sebagai persediaan untuk pusingan tindak balas seterusnya.

2. Penyepuhlindapan (denaturasi) DNA templat dan primer

Selepas DNA templat didenaturasikan menjadi untai tunggal melalui pemanasan, suhu diturunkan kepada kira-kira 55°C dan primer dipasangkan dan diikat pada urutan pelengkap untai tunggal DNA templat.

3. Sambungan primer

Konjugat templat-primer DNA disintesis di bawah tindakan polimerase TaqDNA, menggunakan dNTP sebagai bahan tindak balas dan jujukan sasaran sebagai templat, untuk mensintesis helai replika separa terpelihara baharu yang pelengkap kepada untai DNA templat mengikut prinsip replikasi pasangan asas dan separa terpelihara.

Dengan mengulangi proses denaturation-annealing-extension, lebih banyak "rantai replika separuh terpelihara" boleh diperoleh dan rantai baharu ini boleh digunakan sebagai templat untuk kitaran seterusnya.

Mesin PCR mengambil masa 2~4 minit untuk melengkapkan setiap kitaran, dan seterusnya berulang kali, DNA yang dihasilkan dalam setiap kitaran boleh menjadi templat untuk kitaran seterusnya, dan setiap kitaran menguatkan nombor salinan kawasan khusus DNA antara dua primer sintetik sebanyak 1 kali ganda, dan produk mesin PCR menguatkan dengan cepat dalam bentuk eksponen 2. Selepas 25~230 jam mesin boleh diperkuatkan (selepas 25~30 jam mesin), mesin PCR dapat dikuatkan secara beransur-ansur. gen lebih daripada 109 kali ganda selepas 25~30 pusingan (2~3 jam), dan dalam amalan, ia secara amnya boleh mencapai 106~107 kali ganda.

Kinetik tindak balas mesin PCR

Tiga langkah tindak balas daripada mesin PCR diulang, mengakibatkan peningkatan eksponen dalam jumlah amplifikasi DNA. Penguatan DNA akhir tindak balas boleh dikira menggunakan y=(1+X) n. Y mewakili bilangan salinan serpihan DNA yang dikuatkan, X mewakili kecekapan penguatan purata setiap penguatan, dan n mewakili bilangan kitaran. Nilai teori kecekapan amplifikasi purata ialah 100%, tetapi pada peringkat awal tindak balas sebenar, peningkatan serpihan DNA jujukan sasaran adalah eksponen, dan dengan pengumpulan beransur-ansur produk mesin PCR, serpihan DNA yang dikuatkan tidak lagi meningkat secara eksponen, tetapi memasuki tempoh pertumbuhan linear atau tempoh pegun, " Rs, kesan purata mesin, "stagnasi mesin, " i.R. mencapai Kecekapan purata mesin PCR tidak mencapai nilai teori.

Bioteke Corporation, yang menumpukan pada diagnostik molekul dan pengesanan pantas, khususnya, pada pengekstrakan asid nukleik, ialah pengeluar berteknologi tinggi profesional dan mesin PCR. Ia terletak di Bandar Wuxi, wilayah Jiangsu, China. Jadi, kami tidak sabar-sabar untuk bekerjasama dengan anda.